真核mRNA测序5-6G

真核mRNA测序5-6G

服务介绍：

转录组测序（mRNA-seq）：基于Illumina测序平台，对某一物种或特定细胞在某一功能状态下产生的mRNA进行高通量测序，既可以提供定量分析，检测基因表达水平差异，又可以提供结构分析，发现稀有转录本，并且对差异表达基因进行功能注释。

实验流程：

样本处理-TotalRNA抽提与质检-文库构建-PE150测序-数据分析；

送样运输要求：

1）样品类型：细胞、动物新鲜组织、植物组织、全血、血清、血浆、石蜡切片、或RNA样品。

2）样品的量：新鲜动物组织 ≥100mg（含肌纤维或脂肪等组织的样品 RNA 含量较低，送样量需增加）。新鲜培养细胞 ≥5×10⁶ 个（请清洗后离心得细胞沉淀，用 TRIzol 充分裂解并干冰运输）。新鲜全血 ≥1mL（新鲜血液样本，不可使用冻存血。建议向新鲜血液中加入 3 倍体积的 TRIzol LS 裂解液，干冰运输）。血清，血浆（一般是用至少2ml的全血分离出来的量）。PBMC>1*10⁷(加Trzol混匀，避免反复冻融)。植物组织 ≥1g（含多糖多酚等的复杂植物组织，请尽可能多的送样）。石蜡切片5-10 张/卷（未经 HE 染色的切片；厚度≥5µm；组织区域面积≥10mm×10mm；有核细胞比例＞80%；肿瘤细胞比例＞20%。建议使用 1 年内的 FFPE 样本）。

3）样品质量：RNA无明显降解，提取的总RNA OD260/280值在1.8~2.2之间，浓度 ≥ 500 ng/μl，28S:18S ≥ 1.5，RIN ≥ 7。

4）样品保存：细胞样品或新鲜组织块（切成~50mg的小块）可用TRIZOL或RNA保护剂处理或液氮冻存后，-80℃保存。RNA样品可溶于乙醇或RNA-free的超纯水中，-80℃保存。样品保存期间避免反复冻融。

5）样品运输：样品置于1.5 ml管中，封口膜封好，干冰运输。