脯氨酸的鉴别与含量测定

脯氨酸鉴别

（1）取本品与脯氨酸对照品各适量，分别加水溶解并稀释制成每1ml中约含0.4mg的溶液，作为供试品溶液与对照品溶液。照其他氨基酸项下的色谱条件试验，供试品溶液所显主斑点的位置和颜色应与对照品溶液的主斑点相同。[5]

（2）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（《药品红外光谱集》1041图）一致。[5]

检查

1酸度

取本品2.0g，加水20ml溶解后，依法测定（2010年版药典二部附录Ⅵ H），pH值应为5.9～6.9。[5]

2溶液的透光率

取本品1.0g，加水10ml溶解后，照紫外－可见分光光度法（2010年版药典二部附录ⅣA），在430nm的波长处测定透光率，不得低于98.0%。[5]

3氯化物

取本品0.25g，依法检查（2010年版药典二部附录ⅧA），与标准氯化钠溶液5.0ml制成的对照液比较，不得更浓（0.02%）。[5]

4硫酸盐

取本品1.0g，依法检查（2010年版药典二部附录Ⅷ B），与标准硫酸钾溶液2.0ml制成的对照液比较，不得更浓（0.02%）。[5]

5铵盐

取本品0.10g，依法检查（2010年版药典二部附录Ⅷ K），与标准氯化铵溶液2.0ml制成的对照液比较，不得更深（0.02%）。[5]

6其他氨基酸

取本品，加水溶解并稀释制成每1ml中约含50mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取1ml，置200ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。另取脯氨酸对照品与苏氨酸对照品各适量，置同一量瓶中，加水溶解并稀释制成每1ml中各约含0.4mg的溶液，作为系统适用性试验溶液。照薄层色谱法（2010年版药典二部附录ⅤB）试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇－无水乙醇－浓氨溶液－水（8：8：1：3）为展开剂，展开，晾干，喷以茚三酮的丙酮溶液（1→50），在80℃加热至斑点出现，立即检视。对照溶液应显一个清晰的斑点，系统适用性试验溶液应显两个*分离的斑点。供试品溶液如显杂质斑点，其颜色与对照溶液的主斑点比较，不得更深（0.5%）。[5]

7干燥失重

取本品，在105℃干燥3小时，减失重量不得超过0.3%（2010年版药典二部附录Ⅷ L）。[5]

8炽灼残渣

不得超过0.1%（2010年版药典二部附录Ⅷ N）。[5]

9铁盐

取本品1.0g，依法检查（2010年版药典二部附录Ⅷ G），与标准铁溶液1.0ml制成的对照液比较，不得更深（0.001%）。

10重金属

取本品1.0g，加水23ml溶解后，加醋酸盐缓冲液（pH 3.5）2ml，依法检查（2010年版药典二部附录Ⅷ H*法），含重金属不得超过百万分之十。

11砷盐

取本品2.0g，加盐酸5ml与水23ml溶解后，依法检查（2010年版药典二部附录Ⅷ J*法），应符合规定（0.0001%）。

12细菌内毒素

取本品，依法检查（2010年版药典二部附录ⅪE），每1g脯氨酸中含内毒素的量应小于10EU（供注射用）。

脯氨酸含量测定

取本品约0.1g，精密称定，加冰醋酸50ml使溶解，照电位滴定法（2010年版药典二部附录ⅦA），用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于11.51mg的C5H9NO2。

体内代谢

在谷氨酰激酶(γ- GK)的作用下谷氨酸生成谷氨酰磷酸(γ-GP)，而后在谷氨酸一半醛脱氢酶(GSADH)的作用下生成谷氨酸一半醛(GSA)，GSA自发环化为吡咯琳-5-羧酸(P5C)，在吡咯琳-5-羧酸还原酶(P5CR)的作用下还原为脯氨酸。

　　脯氨酸在植物体内的降解基本上是合成过程的逆过程，这一过程首先发生在线粒体中，脯氨酸在线粒体中由脯氨酸脱氢酶(ProDH)催化，生成P5C，P5C在吡咯琳-5-羧酸脱氢酶(P5CDH)作用下生成谷氨酸，在植物受到渗透胁迫时，氧化降解的过程受到抑制，这样细胞中脯氨酸含量增加，植物复水，此过程又会被诱导，导致脯氨酸含量下降。

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