PRODUCT CLASSIFICATION
产品分类问:我之前定购了大鼠睾酮(T)最低10元充值棋牌 ,检测血清的。我现在想再订购一盒,用于检测细胞,可以吗?
答:大鼠睾酮(T)最低10元充值棋牌 可以检测大鼠血清,血浆,细胞上清液,细胞裂解液等样本。
问:如果我的样本里面含有*,可以检测吗。
答:叠氮钠会影响HRP的活性,对整体检测有干扰,不适合ELISA方法了。
一般细胞裂解液不可能含有叠氮钠,但如果样本中含有叠氮钠,不能做ELISA实验的,如果要用elisa检测 就只能重新裂解
问:那细胞裂解方法是怎么样的呢,加入什么试剂?
答:1. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的zui终浓度为1mM。
2. 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。