免疫组化染色试剂盒怎么使用-上海信帆为您答疑解惑

更新时间：2018-12-06

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免疫组化染色试剂盒怎么使用-上海信帆为您答疑解惑！如何自己做免疫组化染色，上海信帆生物免疫组化染色试剂盒来帮忙！

存储条件：

2~8℃暗处保存。

试剂盒内容：

试剂A（无色液体）：	10ml/kit封闭用正常羊血清原液（含有15mM NaN3）
试剂B（黄色液体）：	1ml/kit生物素化二抗原液（IgG/Bio）
	SPN：生物素标记羊抗兔IgG
	SPN：生物素标记羊抗小鼠IgG
试剂C（橙色液体）：	1ml/kit辣根酶标记链霉卵白素原液（S-A/HRP）

标本染色：

1. 石蜡切片，常规脱蜡至水。
2. 3%过氧化氢孵育5~10分钟，以消除内源性过氧化物酶的活性。
3. 蒸馏水冲洗，PBS浸泡5分钟（如需采用抗原修复，在此步后进行）。
4. 5~10%正常羊血清（PBS稀释）室温孵育10~15分钟，倾去，勿洗。
5. 滴加适当比例的一抗，37℃孵育2~3小时或4℃过夜。
6. PBS冲洗，3分钟×3次。
7. 滴加生物素标记的二抗（1%BSA-PBS稀释），如1:100稀释，则37℃孵育10分钟；1:300稀释，则37℃孵育30分钟.
8. PBS冲洗，3分钟×3次。
9. 滴加辣根酶标记链霉卵白素（稀释和使用方法同二抗）
10. PBS冲洗，3分钟×3次。
11. 显色剂显色（DAB或AEC）。
12. 自来水充分冲洗，复染，封片。

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